A CK-MB está presente em diversos graus no miocárdio e também, mas em menor quantidade, na musculatura esquelética. A atividade da CK aumenta após danos no miocárdio, com um aumento significativo nas frações CK-MM e CK-MB.

Em certa medida, o aumento proporcional na fração CK-MB depende da dimensão dos danos no miocárdio e do histórico de danos no miocárdio. As alterações da proporção de CK-MB para CK-MM podem ser utilizadas no diagnóstico de Infarte do miocárdio (IM), onde a proporção atinge um pico num período de 1,5 horas após o IM.

A sensibilidade do diagnóstico e a especificidade da avaliação do total de CK para o diagnóstico de um IM podem ser melhoradas determinando a relação do aumento de CK em amostras de série obtidas  quando da admissão e 4, 8 e 12 horas após a mesma. Um aumento de 50% por hora durante esse período de tempo permite distinguir um IM agudo da ausência de infarte com uma eficiência global de 94%.No caso de doentes que necessitam de um diagnóstico precoce do infarte do miocárdio, recomenda-se, para confirmação do diagnóstico, um biomarcador de resultado rápido, como por exemplo, CK-MB, mais um biomarcador que proporcione resultados numa fase posterior, como por exemplo, troponina cardíaca. 

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